Contexte
Phytophthora infestans (P.i) est l’agent pathogène responsable du mildiou de la pomme de terre. Cette maladie constitue une contrainte majeure pour la production de ces cultures en raison de sa capacité à se développer rapidement dans des conditions environnementales favorables et des pertes économiques qu’elle peut occasionner.
L’étude de cet organisme nécessite de disposer d’une collection de souches représentatives de la diversité biologique et génétique des populations étudiées. Ces souches constituent une ressource importante pour les activités de recherche portant notamment sur la diversité des populations, les interactions entre l’agent pathogène et ses plantes hôtes, l’évolution de la virulence et l’évaluation de la résistance variétale, notamment les clones issus du programme de création variétale.
La conservation à long terme des souches représente un enjeu essentiel pour maintenir leur disponibilité et préserver autant que possible leurs caractéristiques biologiques au cours du temps. La cryoconservation dans l’azote liquide, à très basse température, constitue une méthode de conservation idéale destiné à soutenir les travaux expérimentaux, à assurer la continuité des activités de recherche et à faciliter la comparaison des résultats obtenus à différentes périodes.
Descriptif
Etendue de la collection
1200 isolats de Phytophthora infestans d’origine belge principalement sont actuellement conservés.
Année de création
1998
Conservation
Phtophthora infestans est conservé sous forme de mycélium dans des cryotubes contenant une solution de glycérol dilué à 10%. Préalablement à la mise en conservation, les isolats sont cultivés en boîtes de Petri contenant du milieu V8-Agar. Une fois la colonie développée dans la boîte de culture, 4 plugs sont découpés à l’emporte-pièce au niveau de la zone de croissance du mycélium et déposés dans le cryotube. Par souche de P.i à conserver, 5 cryotubes sont préparés et placés ensuite dans une cryoboîte. La cryoboîte est ensuite plongée dans l’azote liquide à -196°C au sein d’un tank de conservation destiné à cet effet.
Régénération
Après plusieurs années de conservation sous azote liquide ou lorsqu’il est nécessaire de récupérer une souche de P.i. en vue de son utilisation, les tubes sont enlevés de l’azote liquide et placés dans un bain-marie à 37°C pendant 2 à 4 minutes. Les 4 plugs contenus dans le cryotube sont ensuite placés sur milieu V8-Agar en boîtes de Petri et placé dans un incubateur à 18°C.
Inventaire
L’ensemble des isolats de Phytophthora infestans est référencé dans une fiche d’inventaire. Chaque entrée et sortie d’isolats est enregistré dans cette fiche.
Equipe
